肽N-糖苷酶 F說明書

更新時間：2023-10-24 點擊次數：449

產品描述

PNGase F 是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-連接糖，切割的糖型有：高甘露糖、雜合和複雜寡糖，切割位點為：最內側的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間。PNGase F 還提供不含甘油的形式，便於在 HPLC 方法中取得最佳效果。

本公司 PNGase 是重組表達，並經多步純化製備的重組蛋白。

產品特點

➢ 糖蛋白的 N-連接糖的去糖基化

➢ PNGase F 幾乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-連接糖。

產品活性

活性定義

1 活性單位指在 37℃下， 1×PNGase 反應緩衝體係下，60 min 內將 10 µg 變性 RNase B 中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。糖基化RNase B分子量約 17,000 Da，去糖基後約13,683 Da。

活性測定條件

1× PNGase Buffer：糖蛋白變性緩衝液（含 0.1% SDS，10 mM DTT）、1×GlycoBuffer 2 緩衝液、1% NP-40，37℃反應 1 小時。

糖蛋白於 1×糖蛋白變性緩衝液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分鍾使其變性。

產品組成

酶貯存緩衝液

20 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，5 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.5 @ 25°C

反應緩衝液

10×PNGase Buffer：500 mM Sodium Phosphate (pH 7.5 @ 25°C)

其它緩衝液

10×糖蛋白變性緩衝液（Glycoprotein Denaturing Buffer）：5% SDS，400 mM DTT

10×NP-40：10% NP-40。

運輸與保存

幹冰運輸，-20℃可保存 2 年，避免反複凍融

質量控製

經過嚴格的質控檢測，確保該產品具有最高的活性和純度。

注意事項

1、已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑製，所以在反應混合物中必須加入終濃度 1%的 NP-40。

2、要使天然糖蛋白去糖基化，建議增加酶量並延長溫育時間。